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上海仁捷生物發(fā)布-豬(NGAL2)elisa檢測原理

更新時間:2017-06-29      瀏覽次數(shù):1752

豬中性粒細胞明膠酶相關脂質(zhì)運載蛋白2NGAL2試劑盒(ELISA)試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包豬中性粒細胞明膠酶相關脂質(zhì)運載蛋白2NGAL2)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豬中性粒細胞明膠酶相關脂質(zhì)運載蛋白2NGAL2)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

試劑盒組成:

 

名稱

96孔配置

48孔配置

備注

微孔酶標板

8孔×12

8孔×6

標準品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

樣本稀釋液

6mL

3mL

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

按說明書進行稀釋

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

終止液

6mL

3mL

封板膜

2張

2張

說明書

1份

1份

自封袋

1個

1個

1.  標準品濃度依次為:240、120、60、30、15、7.5 pg/mL

2.  經(jīng)過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過zui大標準品濃度時,可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。

 

實驗結(jié)果計算

所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品濃度。(例如下圖)

 

試劑盒性能

  •  檢測范圍7.5 pg/mL  240 pg/mL。
  •  靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 pg/mL。
  •  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應。
  •  重復性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。
  •  

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